Выход к домашней странице

Первые опыты по клонированию
Клонирование в СССР
Принцип клонирования
Клонирование животных
Клонирование людей
Клоны с измененной ДНК
Модифицированные продукты
Этические аспекты
Правовая сторона дела
Аргументы клонирования
Мифы и проблемы клонирования
Перспективы клонирования


Под рководством Яна Вилмута провели успешные эксперименты по генетическому клонированию овцы. Для этого использовали ядра соматических клеток, полученных из ткани молочной железы взрослой овцы, которые вводили в энуклеированную яйцеклетку. Образовавшуюся диплоидную зиготу стимулировали к дроблению электрошоком и трансплантировали в овцу-реципиента. Через 148 дней приемная мама родила живую овечку – Долли.

В качестве донорного генома использовали три типа клеток, предварительно переведенных в культуру тканевых клеток, выращиваемых на искуссственной питательнойсреде. Ооциты (яйцеклетки) извлекали из овец породы Шотландская черномордаячерез 28-33часа после инъекции им гонадотропного гормонаи у них удалили собственное ядро (энуклеация). При температурк 37 градусов по Цельсию ооциты поместилив искуственную питательную среду с добавлением эмбриональной телячьей сыворотки.в состояни покоя диплоидные доногые клетки переводили путем уменьшения концентрации сыворотки от 10 до 0,5% в течение пяти дней. Эта процедура приводила клетки к выходу из стадии роста клеточного цикла. Слияние донорской клетки с энуклеированным ооцитом и активацию ооцита вызывали электрическим импульсом. Культивирование реконструированных эмбрионов возможно в в яйцеводе овцы,перетянутой лигатурой ближе к рогу маткиЮ или в исеусственной химической среде. Большинство эмбрионов достигало стадии морулы и бластоцисты. После шести дней культивирования эмбрионы трансплантировали в реципиентную мать овцематку, и эмбрионы развивались дальше. Один, два или три эмбриона трансплантировали в овцу-реципиента и доводили до рождения ягнят (успех составлял 1-2%).

Доказательство генетического происхождения ягнят из генома донорных ядер проводили микросателлитным анализом ДНК ягнятовец-донорови реципиентов по четырем полиморфным овечьим маркерам. Этот метод дает возможность точно идентифицировать генетическое происхождение и широко используется в судебно-медицинской практике.

Примерно к 110-му дню беременности в серии эксперимнтов с трансплантацией эмбрионально делящихся клеток четыре плода были мертвы. У двух наблюдалось ненормальное развитие печени. Эксперименты по трансплантации ядер, культивированию зародышей и пересадке их в организм матери-реципиета технически оченб сложны и требуют знания тончайших механизмов биологии развития и высокого профессионального мастерства. Экспериментаторы использовали 236 яйцеклеток, прежде чем удалось получить одну живую, вполне здоровую овечку Долли массой 6,6 кг. У этой овечки ет отца, но зато три матери: овца, давшая свой генетический материал, овца, от которой взяли яйцеклетку, и овца-реципиент, которая вынашивалазнаменитого ягненка.


Copyright © 2006 Andrew Ryakin
Выход к домашней странице


Используются технологии uCoz